单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗体阳性外来物种炎症因子聊天、寡核苷酸表达利润昂扬或操作步骤流量更复杂。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯先生队伍在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低直接费用、跨鱼类、全平台网站兼容的全新解决方案。

论文期刊概况

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内学科院基因隔代基因遗传病规律与发展菌物学探析探讨所和国内基因隔代基因遗传病规律法学会协办的国际金学术研究探析刊物，专注于于通讯稿宝宝学科和医药学基因隔代基因遗传病规律学方面的原创网性探析探讨科研成果。JGG 202历经四年度关系指数7.1，Scopus学术研究探析刊物评介依据CiteScore 9.9，排名第JCR 202历经四年度GENETICS & HEREDITY方面Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY方面Q1区，排名第国内学科院刊物系统分区菌物学类1区(Top刊物)，基因隔代基因遗传病规律学和生化模式与团伙菌物学小类双1区。

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那些是HEATag

巧设的“二一体”设计的

HEATag是由凝集素和HUH内切酶包含的融和核蛋白

「位置定位器」板块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化体现（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「联接器」板块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索长形码参与共价接触。

“1+1>2”的治疗效果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样板图标与朔源。

Fig1: HEATag诸多标识基本原理表示图

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实战经验开展

HEATag知乎问答有点能打？

可能在不同的状况下，体现母乳喂养猎物人体細胞系单人体細胞混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。钻研销售团队为 HEATag 设计了多轮 “经济压力考试”，从组织系到组织核，从常温下到恒温，从新鲜样板到进行固定样板，全坐向校验它的稳定量分析性和安全可靠性以及安全性。

首要轮试验对应喂母乳小动物細胞系：调查者的选择了来源于人、鼠、仓鼠三动物群的两类細胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在在常温使用 HEATag 图标后混合着测序。既定收旧的 11447 个細胞中，85.66% 都能经由 HEATag 长条码精准的切换到原动物群，样版间交叉性污染问题稀少，UMAP 聚类算法探讨更加间接认定书，HEATag 长条码与动物群活性聊天人类基因组特色高宽比一样的。 然后接着，检测状况更进一步骤升级系统：学习工作人员来尝试在 4℃下图标优质血肿瘤細胞、在常温下图标甲醇加固血肿瘤細胞，乃至行直接图标血肿瘤細胞核。的的结果依旧会亮眼睛：因此状况下，样例标识与植物物种个人信息均兼具特好的有关于性，分拆更准确性超 95%。即使甲醇加固会形成一些的转录本交错环境污染，血肿瘤細胞核配制可能会有极富 RNA 损失，血肿瘤細胞多种类型的批注的的结果依旧会与优质样例保持良好相同，单位证明 HEATag 行图标不一加工处理状况下的实验所样例。

Fig2: HEATag 可在不同于條件下结束单癌细胞转录组混样分折

并能标记图片乳期软体绿色和海洋资源无脊梁骨软体绿色的原代体细胞

只要说細胞系测试仪是 “根基题”，那组识范例即是 “叠加题”， 哪些范例并不是因細胞结构类型复杂的、环境认知性特出，将成为标志技術的 “常见问题”，而 HEATag 刚好在哪些 “常见问题” 上表现了优越。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸公司，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不禁能被更准界定，各种关键肿瘤细胞类行的聚类算法效果都明晰可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浮游怪物怪物的适应性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条型码与种群转录组有较高不一性，沒有有因高盐场景诱发的 “标记图片生效”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可保证 喂奶食草动物组建样表多大 scRNA-seq 讲解

Fig4: HEATag可建立剥好浮游生物无脊梁骨家禽重量 scRNA-seq 了解

HEATag与肿瘤细胞的联系会导致转录组的强势提升

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在提交标识钓鱼任务的并且，没有对事件调查的转录酚类化合物析发生影响，以确保了的研究数据统计的准确性性。

Fig5: HEATag不要决定样例的 RNA 形容传统模式

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未来的发展可期

HEATag 能为单神经元分析带来了有什么？

HEATag 的币值，远不单单于 “解决处理符号状况”，它的智能化性和普遍意义，请稍等为单组织探析点击大量将会性

从运用场面来说

HEATag 能铺盖从 “简易较具体分析”（如癌组识机构与正常情况组识机构、肿瘤药物治疗与照表）到 “大市场总量学习”（如组识机构上皮内部图谱画制、高通骁龙量选择）的全面积标准。由于 PIP-seq、Stereo-cell 等轻型可扩容新技术的经济发展，HEATag 还能进的一步改善单上皮内部学习的通量，帮助科研课题创业团队深入推进更高市场总量的建设项目。

从跨研究方向空间来瞧

HEATag 不单应在转录组学，还能与表观表观遗传组学、淀粉酶质组学、空间组学等新水平配合，顺利通过私人定制检索和寡核苷酸队列，HEATag 能够高效营造各个的组学程序，不影向数据信号获取深浅。互相，特征提取HEATag还能够成长 单上皮细胞糖组学设计新水平。

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合作协议动态性

拜谱生物学与陈凯专家教授实现目标初始公司合作想法

值得买注重的是，在 HEATag 技木塑造出强大科技用途优势的游戏背景下，拜谱生态学已与我国南部浅海合理与建筑项目深圳检测室（深圳）陈凯教学促成阶段性企业合作相关。彼此记划强调 HEATag 技木的高新产业的发展实施、研发转为等方法开展的深度警税，助推哪一低投入、跨种群的单生殖血内部标识技木更迅速科技用途于现实研发画面，为很多检测室具备高效能、市场经济的单生殖血内部深入分析方法，力助研发操编辑在生殖血内部生态学学、浅海生态学学、发病制度化等行业领域作为很多达到